Влияние проспидина на митотическую активность опухолевой и нормальной тканей

Ю. А. Ершова, С. М. М и н а к о в а, В. А. Чернов

Всесоюзный научно-исследовательский химико-фармацевтический институт им. С. Орджоникидзе, г. Москва

С целью выяснения некоторых сторон механизма действия проспидина на рост перевиваемых опухолей, нами изучено влияние его на митотическую активность опухолевой (саркома 45) и нормальных тканей (костный мозг и роговица).

Опыты проводили на крысах-самцах весом 110—120 г с перевиваемой саркомой 45. Проспи дин вводили внутрибрюшинно в разовой дозе 145 и 100 мг/кг ежедневно (всего восемь раз), начиная с седьмого дня после перевивки опухоли. Через 12 ч после первой и 24 ч после каждой последующей инъекции животных (по 10 особей в каждый срок) забивали с помощью декапитации. Кусочки опухоли фиксировали в 10%-ном формалине и заливали в парафин, готовили серийные срезы, которые окрашивали гематоксилин-эозином. Костный мозг и роговицу фиксировали в жидкости Карнуа. Из роговицы готовили тотальные препараты и окрашивали гематоксилином Каррачи, костный мозг окрашивали ацето-орсеином и готовили временные препараты. В костном и опухоли подсчет митозов проводили в 2 000 клетках, в роговице — в 200 полях зрения. Для каждого срока определяли I количество митозов, распределение их по фазам, количество и характер патологических митозов. Через сутки после последней инъекции оставшихся в живых животных забивали и вычисляли процент торможения роста опухоли. Весь цифровой материал обрабатывали статистически по Фишеру — Стьюденту.

      12   24        48         72        96        120      144       168     часы

Рис. 1. Влияние проспидина на митотическую активность костного мозга, роговицы и опухоли:

↑— введение препарата; 1 — костный мозг; 2 — роговица; 3 — саркома 45

Результаты опытов по изучению влияния проспидина на митотическую активность опухоли и нормальных тканей приведены на рис. 1. Проспидин в дозе 145 мг/кг вызывал угнетение пролиферативной способности опухолевой ткани. После трех инъекций интенсивность деления опухолевых клеток понизилась в 2,8 раза, уменьшилось количество анафаз, телофазы полностью исчезли (рис. 2). Наиболее выраженный антимитозный эффект наблюдался после восьми инъекций: количество делящихся клеток уменьшилось в 3,7 раза, увеличилось число метафаз, телофазы отсутствовали. Влияние проспидина на митотическую активность опухолевой ткани сопровождалось торможением роста опухоли  на 58—64%. Антимитозный эффект проспидина в опухолевой ткани при применении более низкой дозы (100 мг/кг) был менее выражен. После восьми введений проспидина в этой же дозе отмечалось уменьшение общего количества делящихся клеток на 40%.

□ – профаза; ▒ - метафаза; ▓ - анафаза; ■ – телофаза

Рис. 2. Распределение митозов по фазам в саркоме 45 крыс после введения проспидина(в %):

о — опыт; к — контроль; ч — часы

Наряду с понижением митотической активности в опухолевой ткани проспидин вызывал различные морфологические изменения. В опухолевых клетках и их ядрах отмечался выраженный полиморфизм, многие клетки увеличивались в размерах, приобретали округлую форму. Увеличивалось число ядер, находящихся в состоянии пикноза и лизиса, наблюдались явления вакуолизации цитоплазмы и ядер.

Менее чувствительной к воздействию проспидина оказалась роговица. Через сутки после первой инъекции проспидин в примененных дозах несколько стимулировал интенсивность деления клеток эпителия роговицы. Последующие введения препарата в дозе 145 мг/кг приводили к понижению полиферативной активности роговицы (в 1,5 раза). При этом распределение митозов по фазам в опытной и контрольной группах было примерно одинаковым. Мало чувствительной к воздействию проспидина оказалась ткань костного мозга. Существенных сдвигов как в общем количестве митозов, так и в распределении их по фазам не происходило. Полученные данные о малой чувствительности костного мозга к проспидину согласуются с данными экспериментальных и клинических исследований (Ю. А. Соркина и др. — 1970 г.; В. А. Барсель и др. — 1970 г.; В. С. Погосов и др. — 1970 г.), указывающих на отсутствие угнетающего влияния проспидина на  кроветворение.

Проспидин во всех изученных тканях вызывал различные нарушения в течение митоза, связанные с повреждением хромосом и митотического аппарата (хромосомные и хроматидные мосты, фрагментация хромосом, многополюсные митозы, неравное распределение ядерного материала). Больший процент патологических митозов отмечался в опухолевой ткани, повреждения имели более выраженный характер. В большинстве делящихся опухолевых клеток хромосомы были фрагментированы, беспорядочно разбросаны. Эти повреждения в хромосомном аппарате и системе веретена приводили опухолевые клетки к утрате способности дальнейшего деления, что вызывало снижение митотического индекса в саркоме 45. Хромосомные перестройки в нормальных тканях не оказывали влияния на показатели общего количества митозов.

Проявление антимитозного эффекта проспидина, наблюдаемое не сразу после введения, дает основание полагать, что прспидин действует на клетку в стадии интеркинеза и не препятствует вступлению клеток в митоз. Результаты проведенных опытов показывают, что проспидин в примененных дозах нарушает митотический процесс как в опухолевой (саркома 45), так и в нормальных (костный мозг и роговица) тканях. Наиболее значительный антимитозный эффект наблюдается в опухолевой ткани, где имеются летальные повреждения цитогенетического аппарата опухолевых  клеток. Полученные данные дают основание полагать, что в противоопухолевом эффекте проспидина известная роль принадлежит антимитозному эффекту.

ЛИТЕРАТУРА

1. Барсель В. А., Дисветова В. В., Орлова Р. С., Твердынин М. С., Чернов В. А. «Вопр. онкологии», 1970, №8, с. 36.

2. Погосов В. С., Чернов В. А., Антонин В.ф. «Вестн. оториноларингологии», 1970, №1,с. 57.

3. Соркина Ю. А., Чернов  В.А.,Грушина А. А., Храмченкова С. П. «Вопр. онкологии», 1970, №7, с. 83.